ПТР талдау дегеніміз не?
Полимеразды тізбекті реакция (ПТР) талдау - амплификация деп аталатын процесс арқылы үлгілердегі ДНҚ аз мөлшерін анықтауға арналған зертханалық әдіс. ПТР күшейту кезінде, қызығушылық ДНК талдауға және анықтауға жеткілікті болғанға дейін бірнеше рет көшіріледі. Мысалы, ПТР зәр үлгілерінде болған гонореяны немесе хламидиозды тудыратын организмдерден аз мөлшерде ДНҚ анықтауға болады.
ПТР қалай жұмыс істейді?
ПТР-дегі бірінші қадам - екі жолақты ДНҚ екі жекелеген жіптерге бөлінетін етіп үлгіні қыздыру - бұл денатурация деп аталады. Содан кейін праймерлер , ДНҚ-ның қызығушылығының аяғына дейін сәйкес келетін ДНҚ-ның қысқа үлгілері, үлгі ДНҚ-мен біріктіріледі. Осыдан кейін, ДНҚ-ның полимеразы ДНҚ-ны репликациялауды алғашқы орындарда бастау үшін қолданылады. Ақырында, ДНҚ қайтадан жіптерді бөліп алу үшін қызады, және бүкіл ПТР процесі қайтадан басталады.
Үлгілердегі қызығушылықтың ДНҚ сегментінің көлемі әр ПТР циклі бойынша экспоненталық түрде өседі: бір көшірме екіге, одан кейін төрт болады, содан кейін сегізге айналады және т.б. сондықтан ДНҚ-ның бар-жоғын анықтау үшін (және, егер болса, талдау үшін жеткілікті іріктеуді) анықтау үшін 20-40 цикл қажет.
ДНК-ны синтездеу, праймерлерді қолданып, ДНК-ны созу - әртүрлі температурада болуы үшін полимеразды тізбекті реакцияның барлық сатылары, сондықтан бастапқы араласқаннан кейін, қадамдар термоциклдеу деп аталатын процесс арқылы бақылануы мүмкін, онда кез-келген қадам үшін жеткілікті ұзақ уақыт бойы температура қажетті деңгейде өткізіледі.
Осылайша, ПТР адамның араласуын қажет етпейтін жеке сынақ түтігінде мақсатты ДНҚ көлемін күшейтудің тиімді әдісі болып табылады.
Полимеразды тізбекті реакция 1980-жылдардың басында пайда болған кезде биологиялық техникадағы төңкерісті бейнеледі, ал ПТР-ның құрушысы Кэри Муллис 1993 жылы өзінің жұмысы үшін Химия бойынша Нобель сыйлығын алды.
ПТР неге STD тестілеуіне қатысты?
Полимеразды тізбекті реакция және липаз тізбекті реакциясы сияқты әдістер STD тестілеуі үшін маңыздылығын дәлелдейді. Бұл әдістер үлгілердегі вирустық ДНҚ-ны немесе РНҚ-ны аз мөлшерде тікелей анықтауы мүмкін. Патогеннің генетикалық кодын анықтау патогенді тірі болуын талап етпейді - мысалы, бактериялық мәдениет немесе вирустық мәдениет . Сондай-ақ, инфекцияның адамдарға антиденелерді анықталған реакция (мысалы, ELISA сияқты анықталған) жасау үшін жеткілікті ұзақ уақыт қажет емес. Бұл ПТР әдістері кейде басқа сынақтардан бұрын ауруларды анықтай алады дегенді білдіреді. үлгілерді тірі сақтау немесе дәл уақытында тестілеу туралы қамқорлық қажет.