Генотиптеу және фенотиптеу АҚТҚ-ның есірткіге төзімділігін анықтауға және тіпті болжауға мүмкіндік береді
Терапияны оңтайлы ұстанатын адамдар үшін тіпті ВИЧ-ке қарсы тұрақтылықтың кейбір дәрежелері уақыт өте келе вирустың табиғи мутацияларына байланысты дамиды деп күтілуде. Басқа жағдайларда, қарсыласу субоптималды адгезияға қарсы төзімді АИТВ-ны өсіруге мүмкіндік беретін қарқынды дамуы мүмкін, нәтижесінде емдеу сәтсіздікке әкеледі.
Емдеу сәтсіздікке ұшыраған жағдайда, жаңа вирустың жаңа популяциясын тоқтату үшін альтернативті препараттардың комбинациясы таңдалуы керек.
Генетикалық төзімділік тесті адамның «вирустық бассейнінде» төзімді мутация түрлерін анықтау арқылы бұл вирустың ықтимал антиретровирустық агенттерге қаншалықты сезімтал екенін анықтауға көмектеседі.
АИТВ-ның генетикалық төзімділігін тестілеу үшін екі негізгі құрал: АИТВ-ның генотиптік талдауы және АИТВ-ның фенотиптік талдауы .
Генотип және фенотип дегеніміз не?
Анықтау бойынша, генотип - организмнің генетикалық құрылымы, ал фенотип - бұл ағзаның байқалатын қасиеттері немесе ерекшеліктері.
Генотиптік талдау (немесе генотиптеу) функциясы клеткалардың генетикалық кодтауы немесе ДНҚ-ның мұраланған нұсқауларын анықтау арқылы жұмыс істейді. Фенотиптік талдаулар (немесе фенотиптеу) әртүрлі экологиялық жағдайлардың әсерінен осы нұсқаулардың көрінісін растайды.
Генотип пен фенотиптің өзара байланысы абсолютті болмаса да, генотиптеу көбінесе фенотипті болжаушы бола алады, әсіресе генетикалық кодтың өзгеруі дәрілік қарсылықты дамыған жағдайда сияқты сипаттамалардағы немесе сипаттамалардағы күтілетін өзгерістерге әкеледі.
Фенотиптеу, екінші жағынан, «мұнда-және-енді» екенін растайды. Ол ағзаның қоршаған ортаға қысымның нақты өзгеруіне реакциясын бағалайды, мысалы, ВИЧ әртүрлі препараттарға және / немесе дәрілік заттардың концентрациясына ұшыраған кезде.
АҚТҚ генотиптілігін түсіндіру
АҚТҚ-ны генотиптеу, әдетте, төзімділікке тестілеу үшін қолданылатын ең кең таралған технология болып табылады.
Талдаудың мақсаты вирустың геномының (немесе генетикалық кодын) гаг-пол аймағында нақты генетикалық мутацияларды анықтау болып табылады. Бұл рецепт транскриптазасы, протеаз және интеграз ферменттері - көптеген антиретровирустық препараттардың нысаналары - ДНҚ тізбегіне кодталған аймақ.
Алдымен полимеразды тізбекті реакция (ПТР) технологиясын пайдалана отырып, АИВ геномын күшейте отырып, зертханалық техниктер әртүрлі мутацияны анықтау технологияларын қолдана отырып вирустың генетикасын (немесе «картасын») реттей алады.
Мутациялардың (немесе мутацияның жинақталуының) мутациялары анықталған мутациялар мен вирустың күтілетін сезімталдықтың әр түрлі антиретровирустық препараттарға қатынасын талдайтын техниктермен түсіндіріледі. Онлайндық дерекқорлар тестілік реті «wild-type» вирусының прототипі (яғни, төзімді мутация жоқ ВИЧ) салыстыра отырып көмектесе алады.
Осы сынақтарды түсіндіру есірткіге сезімталдықты анықтау үшін қолданылады, бұл дәрілік затқа төзімділіктің жоғары деңгейіне әкелетін негізгі мутациялардың көптігі.
АҚТҚ фенойытпингін түсіндіру
АИВ-ін фенотиптеу препараттардың қатысуымен адамның ВИЧ-тің өсуін бағалайды, содан кейін бір препаратта бақылау, өсімдіктің вирусының өсуіне салыстырады.
Генотиптік талдау кезінде фенотиптік зерттеулер АИВ геномының гаг-пол аймағын күшейтеді.
Содан кейін генетикалық кодтың бұл бөлімі рекомбинантты ДНҚ технологиясын қолданып жабайы типті клонға «егілді». Нәтижесінде рекомбинантты вирус in vitro (зертханада) сүтқоректілердің жасушаларын жұқтыру үшін пайдаланылады.
Содан кейін вирустық үлгіде әртүрлі антиретровирустық препараттардың концентрациясының артуы 50% және 90% вирустық штаммға дейін жетеді. Содан кейін концентрациялар бақылаудан, жапырақты үлгідегі нәтижелермен салыстырылады.
Relative «fold» өзгерістері дәрілік сезімталдық анықталатын мән ауқымын береді. Төрт рет өзгеру жай ғана есірткінің мөлшерін төрт есе көбейтіп, жабайы түрлерімен салыстырғанда вирустық жолмен жұқтыруды қажет етеді.
Қатпардың көп мөлшері, вирусқа неғұрлым аз сезімтал, белгілі бір дәрілік зат.
Бұл құндылықтар төменгі клиникалық және жоғарғы клиникалық ауқымдарға орналастырылады, ал жоғары деңгейлер дәрілік затқа төзімділіктің жоғары деңгейіне әкеледі. ( Сынақ есебін қараңыз.)
Генетикалық кедергі тесті қашан орындалады?
АҚШ-та генетикалық төзімділік тестілеу дәстүрлі түрде «ақылға қонымсыз» дәрілерге төзімділік бар-жоғын анықтау үшін науқастарды емдеуге арналған. АҚШ-та жүргізілген зерттеулерге қарағанда, берілген вирустың 6% -дан 16% -ына кемінде бір антиретровирустық препаратқа төзімді болады, ал 5% -ы дәрілік препараттардың бірнешеуіне төзімді болады.
Генетикалық төзімділікке тестілеу терапия бойынша дәрі-дәрмектерге қарсы тұру кезінде күдік туғызған кезде де қолданылады. Тестілеу кезінде пациент неструктивті режимді қабылдаған кезде немесе емдеу тоқтатылғаннан кейін төрт апта ішінде, егер вирустық жүктеме 500 данадан көп / мл болса, орындалады. Генотиптік тестілеу, әдетте, аз шығындармен, тезірек жөндеу уақытына ие және жабайы типті және төзімді вирустың қоспаларын анықтауға үлкен сезімталдылықты ұсынады.
Фенотиптік және генотиптік тестілеудің комбинациясы, негізінен, протеаздың тежегіштеріне ұшыраған адамдар үшін күрделі, көп дәрілерге төзімді адамдарға әдетте қолайлы.
Көздер:
Дүниежүзілік денсаулық сақтау ұйымы (ДДҰ). «АҚТҚ-ның есірткіге қарсы тұру фактілері парағы». Женева, Швейцария; 2011 жылғы 11 сәуір.
Ким, Д .; Зиебел, Р .; Садувала, N .; т.б. «ВИЧ-1 АРВ препараттарға төзімділігіне байланысты мутациялар: 10 АҚТҚ-ны бақылау, АҚШ, 2007-2010 жж.». 20-ретровирус және оппортивтік инфекциялар бойынша конференция. Атланта, Джорджия; 2013 жылғы 6 наурыз; Ауызша реферат 149.
Ұлттық денсаулық сақтау институты (NIH). «ВИЧ-1-инфекциясы бар ересектер мен жасөспірімдерде антиретровирустық агенттерді қолдану бойынша нұсқаулық». Bethesda, Мэриленд; 11 қазан 2013 жыл.