Кaryotype тестінде қолданылатын мақсаттар мен қадамдар
Егер сіздің дәрігеріңіз сізге немесе сіздің балаңызға кариотиптік тест ұсынған болса немесе амниоцентезнен кейін бұл тестке не жатады? Кариотиптің қандай жағдайлары диагноз қоюы мүмкін, сынақтарда қандай қадамдар жасалады және оның шектеулері қандай?
Кaryotype тесті дегеніміз не?
Кәріотип - бұл жасушадағы хромосомалардың фотосуреті. Кериотиптерді қан клеткаларының, ұрықтың тері жасушаларының (амниотикалық сұйықтықтан немесе плацентаның) немесе сүйек кемігін жасушадан алуға болады.
Қандай жағдайларды кариотиптік тестілеуден өткізуге болады?
Кериотиптер Даун синдромы сияқты хромосомалық бұзылыстарды экранға шығару және растау үшін пайдаланылуы мүмкін және анықталуы мүмкін бірнеше түрлі ауытқулар бар.
Олардың бірі хромосомалардың біреуінің екі көшірмесінің үш көшірмесі болатын трисомия. Керісінше, моносомиялар бір ғана көшірме (екеудің орнына) болғанда пайда болады. Трисомия мен моносомиялардан басқа, хромосомалардың бір бөлігі хромосоманың жоқтығы және хромосомалық транслокацияның бір хромосоманың бөлігі басқа хромосомаға (және керісінше, теңдестірілген транслоциляцияға) қосылатын хромосомалар жойылады.
Тризомиялардың мысалдары:
- Даун синдромы (трисомия 21)
- Эдвард синдромы ( трисомия 18 )
- Patau синдромы (трисомия 13)
- Klinefelter синдромы (XXY және басқа да вариациялар) - Klinefelter синдромы 500 жаңа туылған нәрестенің 1-де кездеседі және жиілікте
- Үштік X синдромы (XXX)
Моносомияның мысалы мыналарды қамтиды:
- Тернер синдромы (X0) немесе моносомия X - 15% -ға төмендеуі Торнер синдромына байланысты, бірақ бұл трисомия 2000 тірі туғанда ғана бар
Хромосомалық жою мысалдары мыналарды қамтиды:
- Cri-du-Chat синдромы (5 хромосомасы жоқ)
- Уильямс синдромы (жетіспейтін хромосома 7)
Транслокиациялар - Транслокация, оның ішінде Даун синдромын аударудың көптеген мысалдары бар. Робертсон аудармалары өте қарапайым, 1000-ға жуық адамды құрайды.
Мозаика - бұл кейбір клеткалардағы хромосомалық аномалия, ал басқалары болмайды. Мысалы, мозаика Даун синдромы немесе мозаикалық трисомия 9. Толық трисомия 9 өмірге сәйкес келмейді, бірақ мозаикалық трисомия 9 тірі туылуына әкелуі мүмкін.
(Мысал сөз мың сөзден тұрады) Транслокация, трисомия және мозаич Даун синдромы арасындағы айырмашылықты біліңіз.)
Кaryotype қалай жасалады?
Сіздің дәрігеріңізге кариотипті ұсынуға болатын көптеген жағдайлар бар. Олар мыналарды қамтуы мүмкін:
- Хромосомалық аномалияны ұсынатын медициналық жағдайлары бар нәрестелер немесе балалар әлі диагноз қойылмаған.
- Хромосомалық ауытқушылықты білдіретін белгілерге ие ересектер (мысалы, Klinefelter ауруы бар еркектер жыныстық қатынасқа немесе ересекке дейін диагноз қойылмауы мүмкін). Тризомиоздық бұзылулардың кейбірі де диагноз қойылмауы мүмкін.
- Бедеулік - Бедеулік үшін генетикалық кариотип жасалуы мүмкін. Жоғарыда айтылғандай, кейбір хромосомалық ауытқулар ересек адамға дейін диагноз қойылмауы мүмкін. Тернер синдромы бар әйел немесе Klinefelter нұсқаларының біреуі бар адам бедеулікпен күрескенге дейін жағдайды білмейді.
- Пренатальды тестілеу - Кейбір жағдайларда, мысалы, трансокациялық Даун синдромы сияқты, жағдай тұқымқуалайтын болуы мүмкін және егер бала Даун синдромымен туылған болса, ата-аналары сынақтан өткізілуі мүмкін. (Даун синдромының көп бөлігі тұқым қуалайтын ауруы емес, керісінше ықтимал мутация) екенін атап өту маңызды.
- Нәресте туған - Кәріотип көбінесе өліден кейінгі сынақ бөлігі ретінде жасалады.
- Қайталанатын пациенттер - Қайталанатын науқастардың ата-аналық кариотипі осы қайталанатын шығындардың себептері туралы мәліметтер береді. Хромосомалық бұзылулар, мысалы трисомия 16, кем дегенде 50 пайызға төмендейді деп есептеледі.
- Лейкемии - Кaryotype тестілеу лейкемияны анықтауға көмектесуі мүмкін, мысалы, созылмалы миелогенді лейкемия немесе лимфоцитарлы лейкозбен ауыратын кейбір адамдарда табылған Филадельфия хромосомасын іздеу арқылы.
Кaryotype сынағына қатысқан қадамдар
Кaryotype тесті қарапайым қан анализі сияқты көрінуі мүмкін, бұл көптеген адамдарға нəтижелерді алу үшін неге көп уақыт қажет екенін сұрайды. Бұл тест жинаудан кейін өте күрделі. Бұл қадамды қарап шығайық, сол себепті сіз сынақтан өткен кезіңізде не болып жатқанын түсінесіз.
1. Коллекция үлгісі
Кaryotype жасаудың алғашқы қадамы - үлгі жинау. Жаңа туған нәрестелерде қызыл қан клеткалары, ақ қан клеткалары, сарысу және басқа сұйықтықтар бар қан үлгісі жиналған. Белсенді түрде бөлінетін ақ қан клеткаларында (мемлекетке митоз деп аталады) кариотип жасалады. Жүктілік кезінде үлгілеу амниоцентез кезінде жиналған амниотикалық сұйықтық немесе хорионикалық сынамалық сынамалық сынақ кезінде жиналған плацентаның бөлігі болуы мүмкін (CVS). Амниотикалық сұйықтық құрамында ферментті тері жасушалары бар, ол кариотипті генерациялау үшін қолданылады.
2. Зертханаға көлік
Кaryotypes цитогенетика зертханасы деп аталатын нақты зертханада - хромосомаларды зерттейтін зертханада орындалады. Барлық ауруханаларда цитогенетикалық зертханалар жоқ. Егер сіздің аурухана немесе медициналық мекемеде цитогенетика зертханасы болмаса, сынақ үлгісі кариотиптің талдауы бойынша маманданған зертханаға жіберіледі. Сынақ үлгісі арнайы дайындалған цитогенетикалық технологтармен, Ph.D. цитогенетиктер немесе медициналық генетиктер.
3. Жасушаларды бөлу
Хромосомаларды талдау үшін үлгіде белсенді бөлінген жасушалар болуы керек. Қандағы ақ қан клеткалары белсенді бөлінеді. Көптеген ұрық жасушалары белсенді түрде бөлінеді. Үлгі цитогенетика зертханасына жеткенде, бөлінбейтін жасушалар арнайы химиялық заттарды қолданып, бөлінетін жасушалардан бөлінеді.
4. Ұяшықтарды өсіру
Талдау үшін жеткілікті клеткалар болу үшін бөлу клеткалары арнайы медиада немесе жасуша мәдениетінде өсіріледі. Бұл медиада жасушалардың бөлуге және көбейтуіне мүмкіндік беретін химиялық заттар мен гормондар бар. Бұл үрдіс қан клеткалары үшін 3-4 күн, ал ұрық жасушалары үшін аптаға дейін созылуы мүмкін.
5. Ұяшықтарды синхрондау
Хромосомалар адамның ДНҚ-ның ұзын тізбегі болып табылады. Хромосомаларды микроскоптың астында көру үшін хромосомалар метафаз деп аталатын жасушалық бөліну фазасында (митоз) ең ықшам түрде болуы керек. Барлық жасушаларды жасушалық бөлінудің осы нақты сатысына алу үшін, жасушалар хромосомалар ең ықшам болған жерде ұяшықтың бөлінуін тоқтататын химиялық заттармен өңделеді.
6. Хромосомаларды олардың жасушаларынан босату
Бұл шағын хромосомаларды микроскоптың астында көру үшін хромосомдар ақ қан клеткаларынан шығуы керек. Бұл ақ қан жасушаларын арнайы ерітіндімен емдеу арқылы жасалады, бұл олардың жарылуына әкеледі. Бұл жасушалар микроскопиялық слайдта болған кезде жасалады. Ақ қан клеткаларының қалған қалдықтары жуылып, хромосомалар слайдқа жабысып қалды.
7. Хромосомалардың бояуы
Хромосомалар, әрине, түссіз. Бір хромосоманы басқасынан айтарым үшін, слайдқа Giemsa бояуы деп аталатын арнайы бояғыш қолданылады. Giemsa бояуы аденин (A) және тимин (T) негіздеріне бай хромосомалардың аймақтарын бояады. Боялған кезде хромосомдар жеңіл және қараңғы жолақтармен жіптерге ұқсайды. Әрбір хромосомада цитогенетикке бір хромосоманы екіншіден айқындауға мүмкіндік беретін жеңіл және қараңғы жолақтардың нақты үлгісі бар. Әрбір қара немесе жеңіл жолақ жүздеген түрлі гендерді қамтиды.
8. Талдау
Хромосомалар боялғаннан кейін, слайд талдау үшін микроскоптың астына қойылады. Сурет хромосомалардан алынады. Талдаудың соңында хромосомалардың жалпы саны анықталады және өлшемі бойынша хромосомалар анықталады.
9. Хромосомдарды есептеу
Талдаудың алғашқы қадамы хромосомдарды санайды. Адамдардың көпшілігінде 46 хромосом бар. Даун синдромы бар адамдарда 47 хромосома бар. Адамдарда хромосомалар, біреуден артық қосымша хромосомалар немесе хромосоманың жетіспейтін немесе қайталанбаған бөлігі болуы мүмкін. Хромосомалардың санына қарап, Даун синдромын қоса алғанда, түрлі жағдайларға диагноз қоюға болады.
10. Хромосомдарды сұрыптау
Хромосомалардың санын анықтағаннан кейін цитогенетиктер хромосомдарды сұрыптайды. Хромосомаларды сұрыптау үшін цитогенетиктер хромосоманың ұзындығын, орталық хроматтарды (екі хроматидті біріктіретін аймақтарды), G-ленталарының орналасуын және өлшемдерін салыстырады. Хромосомалар жұптарының ең үлкенінен (сандар 1-ден) ең кішіге дейін (22-нөмір) нөмірленеді. Автосомалар деп аталатын 22 жұп хромосом бар. Сондай-ақ жыныстық хромосомалар бар, ал әйелдерде екі Х хромосомасы бар, ал еркектерде X және Y бар.
11. Құрылымды қарап шығыңыз
Хромосомалар мен жыныс хромосомаларының жалпы санын қарастырумен қатар, цитогенетик мамандарда арнайы хромосомалардың құрылымына да қарамайды, оларда жоғалған немесе қосымша материалдың жоқтығы, сондай-ақ транслоцитация сияқты құрылымдық бұзылулар болмауы керек. Транслокация бір хромосоманың бір бөлігі басқа хромосомаға бекітілгенде орын алады. Кейбір жағдайларда хромосомалардың екеуі бір-бірімен алмастырылады (теңдестірілген транслокация) және басқа жағдайларда бір хромосоманың жалғыз бөлігі қосылады немесе жоқ.
12. Қорытынды нәтиже
Ақыр аяғында, соңғы кариотипта хромосомалардың, жыныстың және кез-келген құрылымдық бұзылыстардың жалпы саны хромосомалармен анықталады. Хромосомалардың сандық бейнесі санмен реттелген барлық хромосомалармен жасалады.
Кaryotype тестілеудің шегі
Кaryotype тестілеу хромосомалар туралы көп ақпарат бере алатынына қарамастан, бұл тест мистикалық фиброзға себеп болатын нақты ген мутацияларының бар-жоқтығын айта алмайды. Сіздің генетикалық кеңесшіңіз Сізге кереотиптік сынақтардың сіздерге және олар не істей алмайтынын түсінуге көмектеседі. Кейінгі зерттеулер ауруларда немесе миында гендердің мутацияларының ықтимал рөлін бағалау үшін қажет.
Сондай-ақ, кейде кариотипті тестілеу плаценттік мозаикизм болған кездегі кейбір хромосомалық бұзылуларды анықтай алмайды.
Болашақ
Қазіргі уақытта пренатальдық жағдайдағы кариотиптік тестілеу инвазивті болып табылады, бұл амниоцентез немесе хорионикалық вилус іріктеуін талап етеді. Зерттеулер, ұрықтың генетикалық бұзылыстарын алдын-ала диагноздау үшін әлдеқайда аз инвазивті балама ретінде аналық қан үлгісіндегі жасуша еркін ДНҚ-ны бағалайды.
Төменгі сызық сіздің кaryotype нәтижелерін күтуде
Сіздердің кариотиптеріңіздің нәтижесін күтіп жатқанда, сіз өте алаңдататын сезінесіз және нәтиже алу үшін екі немесе екі күннің ішінде секілді сезінесіз. Достарыңыз бен отбасыларыңызға сүйену үшін сол уақытты алыңыз. Нормалды хромосомалармен байланысты кейбір жағдайларды білу пайдалы болуы мүмкін. Кариотиптің диагностикаланған көптеген жағдайлары жойылып кетсе де, өмір сүру сапасына ие көптеген адамдар өмір сүреді.
> Көздер
- > Кумар, Винай, Абуль К. Аббас және Джон С. Астер. Robbins және Cotran ауруларының патологиялық негіздері. Филадельфия: Elsevier-Saunders, 2015. Басып шығару.
- > Norton, M. және B. Rink. Жақсартылған скрининг дәуірінде инвазивті тестілеудің көрсеткіштерін өзгерту. Перинатология бойынша семинарлар . 2016. 40 (1): 56-66.
- Шах, М., Кинниоглу, С, Мезенбахер, М., Комсток, И., Корт, Дж. Және Р.Лати. Цитогенетиканы және молекулалы кариотиптеуді хромосомалық бұзылу үлгілерін тексеру үшін салыстыру. Тұқымдық және стерилділік . 2017. 107 (4): 1028-1033.